старше 16

Временные методические рекомендации «Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа типа А (ВГА), у людей»

02.05.2009

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа типа А (ВГА), у людей

Временные методические рекомендации

Издание официальное

Москва
2009

4.2.МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа типа А (ВГА), у людей

Временные методические рекомендации

1. Разработаны: Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Г.Г. Онищенко, Е.Б. Ежлова, Ю.В. Дёмина, А.А. Мельникова, Г.Ф. Лазикова, Н.В. Шеенков); ФГУЗ ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Шипулин Г.А., Яцышина С.Б.), ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (Дроздов И.Г., Сергеев А. Н., Агафонов А.П., Шиков А.Н., Сергеев А.Н., Демина О.К., Суслопаров И.М., Терновой В.А.).
2. Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко «___»________ 2009 г.
3. Введены впервые.

Список сокращений

ВГА - вирус гриппа типа А

Биобезопасность – биологическая безопасность
ЛПУ - лечебно-профилактические учреждения
МФА - метод иммунофлуоресцирующих антител
ОТ-ПЦР – метод обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции

Содержание

1. Область применения …………………………………………………

2. Общие требования ……………………………………………………

3. Координация деятельности учреждений, осуществляющих диагностику ВГА ………………………………………….. ………….

4. Правила сбора клинического (секционного) материала …………...

5. Упаковка и транспортирование образцов…………………….………

6. Порядок проведения лабораторных исследований …………………..

7. Обеспечение биобезопасности при проведении лабораторных диагностических исследований ………………………………………….

8. Библиографические источники ………………………………………

Приложение 1 (обязательное). Координаты референс-лаборатории, осуществляющей дополнительное подтверждающее тестирование ВГА ……………………………………………………………………….

Приложение 2 (обязательное).Способы взятия, условия хранения и транспортирования клинического материала для лабораторной диагностики ВГА ………………………………………………………

Приложение 3 (обязательное). Перечень вирусологических лабораторий и лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора, проводящих первичный скрининг на ВГА ……….

Приложение 4 (справочное).Стабилизирующая среда для хранения и транспортирования материала

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы

по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

«____» _______ 2009 года

Дата введения: с момента утверждения

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа типа А (ВГА), у людей

Временные методические рекомендации

1.Область применения

1.1. В настоящих методических рекомендациях определены порядок сбора, упаковки, хранения, транспортирования и выполнения лабораторных исследований биологического материала от больных (и умерших) пациентов при лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа типа А (ВГА).
1.2 Методические рекомендации предназначены для специалистов органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы лечебно-профилактическими и другими организациями, независимо от организационно-правовой формы.

2. Общие требования

Все работы по сбору, транспортированию и подготовке проб клинического и секционного материала осуществляют в строгом соответствии с требованиями МУ 3.4.1028 – 01 «Организация и проведение первичных мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания карантинными инфекциями, контагиозными вирусными геморрагическими лихорадками, малярией и инфекционными болезнями неясной этиологии, имеющими важное международное значение», СП 1.3. 1285 – 03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)», СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности», МУ 1.3.1794-03 «Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности».

3. Координация деятельности учреждений, осуществляющих диагностику ВГА

3.1. При эпидемическом неблагополучии в России и за рубежом по ВГА и при отсутствии лабораторно подтвержденных случаев заболевания людей на данной территории:
3.1.1 Забор материала от пациентов (или умерших) с подозрением на инфекцию ВГА проводят в лечебно-профилактических учреждениях (ЛПУ) после изоляции больного.
3.1.2 Первичное исследование материала от больного осуществляют методами ОТ-ПЦР, ПЦР в режиме реального времени или методом ПЦР с флуоресцентной детекцией результата по конечной точке на базе вирусологических лабораторий ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации или лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора (в соответствии с перечнем – приложение 3).
Исследование проводят методами ОТ-ПЦР или РТГА с антигенами на субтипы вируса H1N1, H3N2 (пр-ва НИИ гриппа, Санкт-Петербург).
При исследовании методом ОТ-ПЦР анализ проводится в два этапа:

  • исследование по обнаружению вирусов гриппа А с помощью тестов «АмплиСенс Influenza virus A/B-FL» или «АмплиСенс Influenza virus A/H5N1-FL»;
  • исследование по идентификации вирусов гриппа А, вызывающих сезонный грипп человека с помощью теста «АмплиСенс Influenza virus A-тип-FL».

Ко второму этапу анализа следует приступать при получении положительного результата по обнаружению вируса гриппа А на первом этапе.
Интерпретация результатов исследования
Обнаружив грипп А с помощью тестов «АмплиСенс Influenza virus A/B-FL» или «АмплиСенс Influenza virus A/H5N1-FL» (в реакции с ПЦР-смесь-1-FEP/FRTInfluenzavirusA), и получив отрицательные результаты с тестом «АмплиСенс® InfluenzavirusA-тип-FL», можно сделать вывод, что в образце присутствует нехарактерный для популяции людей вирус гриппа А (свиней или птиц).
Такие образцы (изоляты) без проведения выделения возбудителя на биосистемах культивирования в ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации требуют детального исследования в одной из референс-лабораторий (приложение 1), так как они являются потенциально пандемически-опасными.
В случае положительного результата второго этапа анализа больному ставится диагноз «сезонный грипп» и может быть проведено в ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации выделения возбудителя на биосистемах культивирования.
При наличии теста для идентификации вируса гриппа свиней А/H1 (например комплект реагентов «АмплиСенс® Influenza virus А/H1-swine-FL» производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора) исследование проводится после получения положительного результата на первом этапе (обнаружение вируса гриппа А).
В случае положительного результата при исследовании с антигенами на субтипы вируса H1N1, H3N2 (пр-ва НИИ гриппа, Санкт-Петербург) больному ставится диагноз «сезонный грипп».
3.1.3 При выявлении положительных результатов первичного исследования материал от больного отправляется на подтверждающее тестирование в референс – лабораторию (в соответствии приложением 3).
В связи с тем, что вследствие мутаций вновь появившиеся высокопатогенные штаммы вируса гриппа свиней изменили свои антигенные свойства, на настоящем этапе детекция вируса методом иммунофлуоресцирующих антител (МФА) может быть не эффективной (давать ложноположительные и ложноотрицательные результаты).
3.1.4 Подтверждающее тестирование положительных образцов осуществляется в референс-лаборатории (приложение 1) с обязательным использованием двух методов: вирусологического исследования (выделение вируса должно осуществляться в условиях лаборатории с уровнем защиты BSL-3) и одного из вариантов ПЦР. Результаты исследований в каждом случае передают в ЛПУ, направившее материал, и в учреждения Роспотребнадзора (управление Роспотребнадзора по субъекту Российской Федерации и ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации) в день получения результата.
3.1.5. При получении положительных результатов подтверждающего тестирования референс-лаборатория проводит изоляцию вируса, изучение его свойств и депонирование в Национальном центре верификации диагностической деятельности, осуществляющий функции государственной коллекции, расположенной на базе ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор».
3.2. При наличии лабораторно подтвержденных случаев заболевания людей ВГА на данной территории и при наличии следующих данных эпидемиологического анамнеза:
- контакт в течение срока менее чем 7 дней до появления первых клинических признаков с больным, у которого лабораторно подтверждено инфицирование высокопатогенными штаммами гриппа;
- контакт в течение срока менее чем 7 дней до появления первых клинических признаков с больным острым респираторным заболеванием неясной этиологии, в том числе закончившимся летально;
- наличие профессионального риска инфицирования (врачи-инфекционисты, сотрудники подразделений, работающих с вирусом гриппа)
3.2.1 Забор материала проводит специально обученный персонал лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ).
3.2.2 Первичное исследование материала осуществляют на базе вирусологических лабораторий ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации или лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора (в соответствии с перечнем – приложение 3).
3.2.3 Подтверждающее тестирование положительных образцов осуществляется в референс-лаборатории(приложение 1) с обязательным использованием двух методов: вирусологического исследования (выделение вируса должно осуществляться в условиях лаборатории с уровнем защиты BSL-3)и одного из вариантов ПЦР. Результаты исследований в каждом случае передают в ЛПУ, направившее материал, и в учреждения Роспотребнадзора (управление Роспотребнадзора по субъекту Российской Федерации и ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации) в день получения результата.
3.3. При исследовании образца от больного, имеющего в анамнезе контакт с лицами, которым был поставлен лабораторно подтвержденный диагноз «грипп, вызванный высокопатогенным штаммом вируса гриппа свиней»:
3.3.1 Забор материала проводят в ЛПУ при подозрении на заболевание ВГА.
3.3.2 Первичное исследование материала осуществляют на базе вирусологических лабораторий ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации или лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора (в соответствии с перечнем – приложение 3) с использованием ОТ-ПЦР.
3.3.3 Обязательное подтверждающее тестирование в референс-лаборатории не проводится. Направление материала в референс-лабораторию осуществляется в случаях возникновения противоречивых результатов при первичном тестировании.

4 Правила сбора клинического (секционного) материала

4.1 Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник лечебно-профилактического учреждения, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность ВГА. Забор производят в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры, стерильными инструментами. Все виды работ проводят с соблюдением противоэпидемического режима, согласно СП 1.3 1285 – 03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)».
4.2 Упаковка, маркирование, условия хранения и транспортирования материала для проведения лабораторной диагностики ВГА должны соответствовать требованиям СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности» и настоящих методических указаний (приложение 3).
4.3. Для исследования забирают следующие виды клинического материала:

  • смывы из полости носа и ротоглотки (для ОТ-ПЦР-анализа);
  • мазки из полости носа (для ОТ-ПЦР-анализа) и ротоглотки (для ОТ-ПЦР-анализа);
  • носоглоточное отделяемое (для выделения вируса, ОТ-ПЦР-анализа).

Целесообразно также включать в исследование аспираты из трахеи, бронхоальвеолярный лаваж и биоптаты легких при возможности их забора. Данные процедуры осуществляет подготовленный медицинский персонал в соответствии с МУ 3.4.1028 – 01 «Организация и проведение первичных мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания карантинными инфекциями, контагиозными вирусными геморрагическими лихорадками, малярией и инфекционными болезнями неясной этиологии, имеющими важное международное значение».
Перечисленные выше процедуры по забору клинического материала обученный медицинский персонал осуществляет в средствах индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор типа ШБ-1 или РБ «Лепесток-200»), защитных очках или щитках для защиты лица, бахилах, двойными резиновыми перчатками. После процедуры отбора материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются антисептиками в соответствии с СП 1.3. 1285 – 03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)».
Выбор времени забора клинического материала очень важен, так как наиболее высокое содержание вируса в дыхательных органах человека регистрируется в течение первых четырех дней после появления признаков заболевания. Образцы должны быть собраны в течение 3 суток после появления клинических признаков, указанных в п. 6.1.
Для постмортальной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки.
От одного больного должно забираться не менее трех видов клинического материала. Обязательно следует забирать мазки из полости носа и ротоглотки и носоглоточное отделяемое. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.
4.4 Сбор материала производят в пробирки со стабилизирующей средой, приготовленной согласно приложению 4, и/или в пробирки с транспортной средой, предоставляемой (или рекомендуемой) фирмой-производителем тест-систем.
4.5 Отправку материала в лабораторию осуществляют в транспортной таре со стабилизирующей средой (приложение 4).

5. Упаковка и транспортирование образцов

5.1 Все материалы, доставляемые в лабораторию, должны быть герметично упакованы в соответствии с СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности»:
1) в транспортную емкость (плотно закрывающиеся пластмассовые пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками, проверенные на герметичность); плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируют различными пластификаторами (парафин, парафильм и др.); емкость маркируют.
2) в плотный полиэтиленовый пакет подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки; полиэтиленовый пакет следует герметично заклеить или запаять.
5.1.1. В отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают бланк направления с указанием: наименование направляющего учреждения, ФИО больного, возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, вид материала, дата и время взятия материала.
5.1.2 Пакеты с образцами от одного пациента вместе с направлением упаковывают во второй плотный полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет.
5.2 Герметично закрытые полиэтиленовые пакеты помещают в термоизолирующий плотно закрывающийся контейнер (термос), приспособленный для транспортирования биологических материалов.
5.2.1. В термоконтейнеры и термосы помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения. Сроки и условия транспортирования упакованных проб клинического материала указаны в приложении 2.
5.3 Транспортирование проб клинического материала в референс-лабораторию, вирусологические лаборатории и лаборатории учреждений противочумной системы Роспотребнадзора осуществляется нарочным (и), информированным о правилах доставки материала в соответствии с п.3.4. СП 1.2.036-95.

6. Порядок проведения лабораторных исследований

6.1 При отсутствии лабораторно подтвержденных случаев заболевания людей на данной территории лабораторные исследования с целью диагностики ВГА следует проводить у пациентов с респираторными заболеваниями тяжелого течения и неясной этиологии при наличии как минимум двух из перечисленных симптомов:
- фебрильная лихорадка с температурой тела выше 380C;
- насморк или заложенность носа;
- боль в горле;
- кашель;
- затрудненное дыхание или дыхательная недостаточность.
в комбинации хотя бы с одним из следующих эпидемиологических признаков в период 1-7 дней перед появлением симптомов :
- посещение мест регистрации заболевания ВГА у людей;
- тесный контакт (в радиусе 1 метра) с лицом, являющимся подозрительным, вероятным или подтвержденным случаем ВГА;
- контакт с погибшими или больными свиньями, уход, убой, разделка, подготовка к употреблению свинины, или контакт с их останкам или объектами окружающей среды на территории, где в течение последнего месяца были заподозрены или подтверждены случаи инфекции ВГА у животных или людей;
- манипуляции с образцами клинического материала (от животных или людей), подозрительным на зараженность ВГА в лаборатории или в иной обстановке;
- употребление сырых или недостаточно приготовленных продуктов из свинины на территории, где в течение последнего месяца были заподозрены или подтверждены случаи инфекции ВГА у животных или людей.
- тесный контакт с лабораторно подтвержденными инфицированными ВГА животными. Данный случай расценивается как подозрительный случай ВГА.
Вероятный случай ВГА - лицо, умершее от необъясненного острого респираторного заболевания, которое расценивается как эпидемиологически связанное по времени, месту и экспозиции с вероятным или подтвержденным случаем ВГА, а также лицо, отвечающее критериям для подозрительного случая, и одному из дополнительных критериев:

  • инфильтраты или признаки острой пневмонии на рентгенограмме грудной клетки плюс признаки дыхательной недостаточности (гипоксемия, выраженное тахипноэ) или
  • положительный результат лабораторного подтверждения инфекции, вызванной вирусом гриппа А, но недостаточное лабораторное подтверждение инфекции.

6.2. При наличии лабораторно подтвержденных случаев заболевания людей ВГА на данной территории показанием к обследованию являются клинические симптомы, приведенные в п.6.1. Дополнительные эпидемиологические признаки являются необязательными.
6.3. Исследование секционного материала от умерших на наличие вируса ВГА проводят при:
- сходстве клинической картины заболевания, приведшего к летальному исходу, с описанной в п. 6.1 или невозможности исключения такой клинической картины в анамнезе и при наличии в анамнезе хотя бы одного из перечисленных в п.п. 6.1 дополнительных эпидемиологических признаков.
6.4. Исследования проводят с использованием диагностических тест-систем, разрешенных к применению в установленном порядке.
6.5. При проведении первичного тестирования на наличие вируса ВГА должны исследоваться не менее 2 видов клинического материала (например: мазки из полости носа и из ротоглотки) с использованием метода - ОТ-ПЦР.
6.6. При получении отрицательных результатов исследования всех образцов выдается окончательный отрицательный ответ.
При отсутствии регистрации заболевания людей, вызванных ВГА, на данной территории при получении хотя бы одного положительного результата при использовании ОТ-ПЦР выдается предварительный положительный ответ и образцы направляют для подтверждающего тестирования в референс-лабораторию.
В период регистрации заболевания людей, вызванных ВГА на данной территории, обязательное подтверждающее тестирование не проводят, и при получении хотя бы одного положительного результата при использовании ОТ-ПЦР выдается окончательный положительный ответ.
6.7. При подтверждении в референс-лаборатории положительного результата первичного тестирования, при исследовании хотя бы одного вида клинического материала выдается окончательный положительный ответ.
При получении в референс-лаборатории отрицательных результатов исследования двух видов клинического материала проводится повторное тестирование. При получении аналогичного результата выдается окончательный отрицательный ответ.

7. Обеспечение биобезопасности при проведении лабораторных диагностических исследований

7.1 Первичное (скрининговое) исследование материала от больного, подозрительного на заражённость вирусом ВГА, проводят в вирусологических лабораториях на базе вирусологических лабораторий ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Российской Федерации или лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора (в соответствии с перечнем – приложение 3), имеющих разрешение на работу с ПБА III - IV группы патогенности. Все манипуляции по забору образцов от больных обученный медицинский персонал осуществляет в средствах индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор типа ШБ-1 или РБ «Лепесток-200»), защитными очками или щитком для защиты лица, резиновыми перчатками в боксе биологической безопасности II класса.
Подтверждающее тестирование осуществляется в референс-лаборатории (приложение 1).
7.2 Проведение работ по проведению вирусологических исследований должны выполняться в лабораториях с уровнем безопасности BSL3: заражение культур клеток или куриных эмбрионов, а также связанных с возможностью образования аэрозоля осуществляют в боксах безопасности III класса. Работы проводят в изолирующем костюме «Кварц».
7.3 Аптечка экстренной профилактики лабораторий, проводящих диагностику заболеваний, вызванных ВГА, должна быть укомплектована в соответствии с СП 1.3.1285-03 и дополнена препаратами группы азельтамивира («Тамифлю» или аналоги).
7.4 Режимы обеззараживания различных объектов при лабораторной диагностике ВГА (в соответствии с СП 1.3.1285-03).
7.4.1 Обеззараживание поверхностей помещения (пол, стены, двери), оборудования, рабочих столов и др. – двукратным протиранием с интервалом 15 мин 6% раствором перекиси водорода или 3% раствором хлорамина (экспозиция 120 мин), либо любым дезинфицирующим средством, обладающим вирулицидной активностью, с последующей обработкой УФ в течение 60 мин.
Запрещено одновременное использование 6% раствора перекиси водорода и 3% раствора хлорамина в пределах одной лаборатории в связи с опасностью взрывоподобного характера протекания химической реакции при смешении этих растворов.
7.4.2 Обеззараживание защитной одежды осуществляют:
а) кипячением в 2% растворе соды в течение 30 мин с момента закипания;
б) замачиванием на 30 мин при 50°С в 3% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства.
7.4.3 Обеззараживание перчаток – замачиванием на 60 мин в 6% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства или в 3% растворе хлорамина.
7.4.4 Обеззараживание лабораторной посуды, автоклавируемых дозаторов, наконечников, вируссодержащих жидкостей, агарозного геля, инструментария из металла проводится методом автоклавирования – давление 2,0 кГс/см2 (0,2 Мпа), температура 132±2°С, время 45 мин.
7.4.5 Обеззараживание дозаторов – двукратным протиранием поверхностей дозатора с интервалом 15 мин 6% раствором перекиси водорода, с последующей обработкой в парах формалина в течение 60 мин.

8 Библиографические источники:

  • Методические указания МУ 3.4.1028 – 01 «Организация и проведение первичных мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания карантинными инфекциями, контагиозными вирусными геморрагическими лихорадками, малярией и инфекционными болезнями неясной этиологии, имеющими важное международное значение».
  • Санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)».
  • Санитарно-эпидемиологические правила СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности».
  • Методические указания МУ 1.3.1794-03 «Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности».
  • Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека № 751 от 23.10.2005 г. «Об учреждении Временного регламента взаимодействия территориальных управлений Роспотребнадзора по субъектам Российской Федерации и федеральных государственных учреждений здравоохранения – центров гигиены и эпидемиологии в субъектах Российской Федерации»
  • Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека № 373 от 31.03.2005 г. «О совершенствовании системы эпидемиологического надзора и контроля за гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями».

Приложение 1 (обязательное)

РЕФЕРЕНС-лаборатории, осуществляющие ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ подтверждающее тестирование ВГА

1) Научно-методический центр по референс-диагностике и изучению высокопатогенных штаммов вируса гриппа - НМЦГ, Референс-центр по мониторингу за гриппом птиц и гриппом, вызванным высокопатогенными штаммами, Национальный центр верификации диагностической деятельности, осуществляющий функции государственной коллекции, организованные на базе ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» (630 559, Наукоград Кольцово, Новосибирская обл., тел/факс (383) 336-75-40, E-mail: shestopalov@vector.nsc.ru );
2) Центр специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекций (141 300, Московская обл., г. Сергиев Посад-6, тел./факс (09654) 4-57-44);
3) Референс-центр по мониторингу за гриппом, ГУ Научно-исследовательский институт гриппа РАМН, Национальный центр воз по гриппу и ОРЗ, Адрес: 197022, Санкт – Петербург, ул. Профессора Попова, 15/17, корпус В, телефон/факс: 234-62-00 факс. 234-59-73,
4) Референс-центр по мониторингу за гриппом, ГУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН Центр экологии и эпидемиологии гриппа [Адрес:123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 16, Тел, (499)1902842, (499)1902046, факс: (499)1902867].
5) Референс-центр по мониторингу за инфекциями верхних и нижних дыхательных путей ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, 111123, Москва, ул. Новогиреевская 3а, тел. (495) 305-5190, факс (495) 305-5423, e-mail: info@pcr.ru
6) Учреждения противочумной системы.

По этим телефонам можно получить любую дополнительную разъясняющую информацию.

Приложение 2 (обязательное)

Способы взятия, условия хранения и транспортирования клинического материала для лабораторной диагностики ВГА

1. МАЗКИ ИЗ РОТОГЛОТКИ

1.1. Сбор материала

Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой.
После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

1.2. Предобработка проб

Не требуется.

1.3. Метод исследования

ОТ-ПЦР

1.4. Условия хранения материала

При температуре от 2 до 8°С – в течение трех суток.
При температуре минус 70°С или в жидком азоте – длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала. Температура хранения минус 200С не допускается.

1.5. Условия транспортирования материала

В специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:

  • при температуре 0-4 0С – не более трех суток;
  • при температуре минус 700С или в жидком азоте – длительно.

Температура транспортировки минус 200С допускается только с учетом однократного замораживания и транспортировки без размораживания не более 4 дней.

2. Мазки из полости носа

2.1. Сбор материала

Мазки (слизь) берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Зонд с ватным тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.
Для ПЦР-анализа. После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую микропробирку с 500 мкл стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

2.2. Предобработка проб

Не требуется.

2.3. Метод исследования

ОТ-ПЦР

2.4 Условия хранения материала

См. п.п. 1.4.

2.5. Условия транспортирования материала

См. п.п. 1.5.

3. Смывы из полости носа

3.1.Сбор материала

Сбор материала производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью одноразового шприца вводят по 3-5 мл теплого стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида. Промывную жидкость из обоих носовых ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного обеззараживания автоклавированием.

3.2. Предобработка проб

Не требуется.

3.3. Метод исследования

ОТ-ПЦР

3.4. Условия хранения материала

См. п.1.4.

3.5. Условия транспортирования материала

См.п.1.5.

4. Смывы из ротоглотки

4.1. Сбор материала

Перед сбором материала необходимо предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек) 8-10 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного обеззараживания автоклавированием.

4.2. Предобработка проб

Не требуется.

4.3. Метод исследования

ОТ-ПЦР

4.4. Условия хранения материала

См. п.1.4.

4.5. Условия транспортирова-ния материала

См.п.1.5.

5. НОСОГЛОТОЧНОЕ ОТ


02.05.09


Вернуться в раздел